尊龙凯时细胞培养方案说明

培养条件

使用1640培养基，添加10% FBS和1% PS，适用于贴壁和悬浮细胞的培养，维持在37°C的温度下进行培养。

传代方法

第一次建议传代比例为1:2。如果细胞的汇合度未超过80%，则需将培养液收集至离心管，保留5ml完整培养基，并继续在37°C、5% CO2的条件下培养；若细胞密度超过80%，便可以进行传代。

换液频率

每2天更换培养液，以保持细胞的良好生长状态。

细胞处理与培养

在收到尊龙凯时的细胞后，需使用75%酒精清洁细胞瓶的外表，随后在超净台内严格无菌操作。将细胞瓶放入37°C、5% CO2的培养箱静置3-4小时，待细胞状态稳定后进行操作。通过显微镜观察细胞的生长情况，并拍摄不同倍数的照片（推荐40x、100x、200x各一张），前三天的照片将作为重要的售后依据，若未提供照片，则默认接收状态良好。

细胞传代步骤

贴壁细胞的传代步骤如下：

• 弃去培养上清，并用不含钙镁的PBS洗涤细胞1-2次。
• 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml，置于培养箱中消化1-2分钟，观察细胞状态。若细胞变圆并脱落，立即吹打培养瓶，加入超过5ml的完全培养基终止消化。
• 轻轻吹打使细胞完全脱落，转移悬液至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟，弃去上清，添加1-2ml完全培养基重悬。
• 将细胞悬液按1:2比例分瓶传代，每个新瓶中补充5-8ml新的完全培养基，放入37°C、5% CO2的培养箱中继续培养。

注意事项

部分细胞在运输过程中可能会脱落，这种现象是正常的。如脱落较多，应将所有培养液收集至离心管，进行离心分离。可以使用胰蛋白酶处理沉淀细胞，随后进行分瓶传代，保持尊龙凯时细胞的活力和生长。

通过遵守上述科学的细胞培养和处理标准，确保了细胞的健康生长，进而提升实验的可靠性与结果的准确性。