细胞培养条件与传代步骤

尊龙凯时提供的细胞培养条件如下：

• 气相组成：95%空气 + 5%二氧化碳
• 培养温度：37℃

细胞系介绍

A-673（STR）是一种人源横纹肌肉瘤细胞系，广泛应用于癌症研究、肿瘤生物学以及药物筛选等多个领域。通过短串联重复序列（STR）分析进行身份认证，确保其遗传特征的稳定性和实验的可重复性，适合体外模拟横纹肌肉瘤的行为和分子机制研究。

细胞传代方法

细胞传代的一般建议为第一次以1:2的比例进行传代。其详细步骤如下：

1. 弃去培养上清，使用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入约1-2ml 0.25%的胰蛋白酶消化液，放入37℃培养箱中消化1-2分钟，过程中在显微镜下观察，若细胞大部分变圆并脱落，则迅速将其拿回操作台，轻敲培养瓶后加入5ml完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞，使其完全脱落后吸出，然后将悬液转移至15ml离心管中，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，并补加1-2ml完全培养基重悬。
4. 根据细胞悬液的比例进行分瓶传代，例如分两个T25瓶，并补充新的完全培养基至每瓶5-8ml，最后放入37℃、5% CO₂的细胞培养箱中。

细胞处理与运输

细胞受到运输后处理的注意事项：

• 收到细胞后，请及时核对培养瓶上的细胞名称是否与订购的一致，并检查瓶身是否有破损或漏液。
• 在显微镜下观察细胞生长情况，对细胞进行各倍数拍照保存，前三天的照片极为重要。
• 若细胞在运输过程中出现异常，敬请立即联系尊龙凯时，提供相关证明，经过核实可进行重新发货。

细胞冻存与复苏

细胞生长至覆盖培养瓶的80%时，进行以下冻存步骤：

1. 弃去培养液，使用PBS清洗细胞一次。
2. 添加胰蛋白酶消化液，待细胞回缩变圆后，用完全培养基终止消化，轻吹使细胞脱落，接着转移到离心管中。
3. 离心后加无血清冻存液，充分混匀后装入冻存管，快速放入-80℃冰箱，转存液氮罐需至少存放24小时。

注意事项

在细胞操作过程中，如有细胞脱落情况，请勿惊慌。这在运输过程中是正常现象。如有疑问或需提供进一步帮助，请随时联系尊龙凯时，我们将竭诚为您服务。

我们致力于为生命科学研究提供最佳的细胞培养解决方案，确保细胞的健康状态和实验的成功。