在2025年4月，广州医科大学的郑国沛研究员、尹江老师和李楠老师的团队，发表了一篇重要的研究论文，题为“LAMA4+ CD90+ eCAFs通过诱导CD8+ T细胞衰老为肝癌提供免疫抑制微环境”，刊登在《Cell Communication and Signaling》。该研究首次阐明了CD90+ eCAFs通过LAMA4-ITGA6信号通路如何诱导CD8+ T细胞的衰老。同时，动物实验表明，靶向LAMA4能够抑制肝癌的恶性转化，并与抗PD-1治疗协同作用。这一发现为肝癌的免疫治疗开辟了新的方向，也为逆转肿瘤免疫抑制微环境及增强免疫检查点阻断疗效提供了新策略。

研究背景

肝细胞癌（HCC）是全球最常见的原发性肝癌类型，且是癌症相关死亡的第三大原因。尽管在肝癌的研究与治疗上取得了显著进展，患者的临床结果依然令人担忧。肿瘤微环境（TME）在肝癌的发展与进展中起着至关重要的作用，肝脏特有的微环境特征使得这种情况更加复杂。研究显示，肝癌中存在大量的癌症相关成纤维细胞（CAFs），然而不同亚型CAFs在肝癌微环境中的具体作用尚不清楚。CD8+ T细胞则是抗肿瘤免疫的重要成分，负责识别并清除癌细胞。eCAF与CD8+ T细胞之间的相互作用可能促进肿瘤的免疫逃逸。

研究结果

CAFs的异质性及其在肝癌中的作用

研究团队通过分析scRNA-seq数据，发现原发性与转移性肝癌中成纤维细胞比例显著增加，且成纤维细胞的比例与不良预后正相关。研究人员对不同类型肝癌中的成纤维细胞进行无监督聚类分析，并将其分为五种类型：细胞外基质CAFs（eCAFs）、炎症性CAFs（iCAFs）、血管CAFs（vCAFs）、肌纤维母细胞CAFs（myCAFs）和抗原呈递CAFs（apCAFs）。其中，eCAFs的比例与肝癌的不良预后正相关，并主要分布在肿瘤边缘，靠近CD8+ T细胞区域。

CD90+ eCAFs通过LAMA4介导CD8+ T细胞功能抑制

研究中，科学家从自发小鼠HCC模型中分离出CD90+ eCAF，并与原代小鼠CD8+ T细胞共培养，发现CD8+ T细胞的抗肝癌细胞毒性能力受到抑制。随后，研究团队发现CD90与LAMA4在CAFs中共表达的关系，且LAMA4高表达区域的CD8+ T细胞浸润更多。通过siRNA敲低LAMA4及重组小鼠LAMA4蛋白刺激小鼠CD8+ T细胞的实验，表明CD90+ eCAFs可通过LAMA4抑制T细胞的效应功能，去除CD90+ eCAF中的LAMA4可有效逆转CD8+ T细胞的抑制状态。

LAMA4通过ITGA6抑制CD8+ T细胞功能

His-pulldown实验与质谱分析揭示LAMA4的潜在T细胞表面受体为ITGA6蛋白。中和ITGA6后的CD90+ eCAF与CD8+ T细胞共培养时，后者表现出更强的增殖能力，且GZMB与穿孔素的表达也显著增加。综上所述，CD90+ CAF中的LAMA4通过ITGA6损害CD8+ T细胞的功能。

LAMA4通过诱发T细胞衰老诱导CD8+ T细胞免疫抑制

为了探讨LAMA4诱导CD8+ T细胞免疫抑制的机制，研究者用重组LAMA4刺激原代CD8+ T细胞和小鼠细胞毒性T细胞系（CTLL-2），进行RNA-seq、蛋白质组学、磷酸化蛋白质组学分析及流式细胞术检测。结果显示，重组LAMA4促进了细胞衰老指标的表达，激活了RAS信号与DNA损伤信号通路。进一步发现，抑制ITGA6或ATM可防止LAMA4诱导的CD8+ T细胞衰老，因此可以推测LAMA4通过ITGA6介导的DNA损伤信号通路诱导CD8+ T细胞衰老。

靶向LAMA4阻断肝细胞癌的进展并增强抗肿瘤免疫治疗

为研究靶向LAMA4对肝细胞癌的影响，研究团队采用靶向LAMA4的胆固醇修饰siRNA对自发小鼠HCC模型进行治疗。结果表明，siLAMA4治疗组肿瘤数量与大小显著减少，且衰老指标、DNA损伤指标及RAS表达也明显下调。结合修饰siRNA与抗PD-1的联合治疗，在微观和宏观水平上均显示出优于单一治疗的疗效。这些发现表明，靶向LAMA4有助于阻止CD8+ T细胞衰老，从而减缓肝细胞癌的进展，并提高肝癌免疫治疗的效率。

结论与展望

尽管免疫疗法在多种癌症中取得良好效果，但仍然未能为肝癌患者带来显著疗效，治疗仍然面临挑战。CAFs作为肝癌微环境中最丰沛的成分之一，关键角色不可忽视。研究首次揭示eCAFs通过LAMA4抑制CD8+ T细胞的抗肿瘤活性，并阐明了LAMA4与CD90之间的关系。此外，CD90+ eCAFs通过LAMA4-ITGA6信号通路诱导CD8+ T细胞衰老，显示LAMA4可能成为肝癌治疗的新靶点，并为免疫治疗提供辅助策略。尽管胆固醇修饰的LAMA4 siRNA在动物模型中显示良好效果，但其在人体中的安全性与特异性仍需进一步验证。未来，我们将继续探索其他CAF亚型在TME中的作用及更多靶向eCAFs的策略。

尊龙凯时期待通过靶向肿瘤微环境中的关键分子，为肝癌患者带来更多希望及积极的治疗成果！