抗体药物，包括单克隆抗体、双特异性抗体、抗体片段、抗体共轭药物及抗体融合蛋白等，以其强大的靶向性、高度的特异性和较低的毒副作用，在自身免疫疾病和抗肿瘤治疗领域发挥了重要作用。面对巨大的市场需求，开发新型抗体药物及优化下游生产工艺，不仅具有显著的经济价值，也具备深远的社会意义。

抗体的纯化过程相对复杂，需要结合多种分离手段来设计合理的纯化流程，以高效获得高质量的抗体产品。抗体的下游加工通常包括以下几个步骤：第一，细胞澄清收获，通过离心、过滤等方法去除细胞和细胞碎片；第二，亲和捕获，采用Protein A亲和层析来捕获抗体；第三，低pH孵育，以有效去除病毒；第四，中间纯化与精细纯化，以去除与产品及过程相关的杂质；第五，纳滤与超滤，最终获得纯净的抗体产品。

在这一过程中，使用Protein A亲和层析是关键，它源自金黄色葡萄球菌，特异性地结合IgG FC片段，通常可以在一步纯化中达到90%以上的纯度，适用于捕获人源抗体（非IgG3）及FC融合蛋白。低pH洗脱和孵育能有效减少7-8log的病毒负荷，从而简化后续的纯化步骤。选择Protein A层析介质时，载量、流速、耐碱性、使用寿命及Protein A残留量是重要考量因素。为确保安全纯度，捕获后的抗体样品需进一步去除宿主蛋白、宿主DNA、聚集体、抗体片段、内毒素及脱落的Protein A等相关杂质，离子交换层析和疏水层析是常用的分离手段。

离子交换层析依据抗体与杂质的电荷差异实现分离，是抗体纯化过程中的关键步骤。阴离子交换层析常采用流穿模式去除内毒素、病毒以及其他杂质，而阳离子交换层析则通常采用结合洗脱模式，以便在酸性条件下结合抗体，通过提高洗脱缓冲液中的盐浓度或调整pH进行洗脱，达到良好的除杂效果。尤其是高分辨率及高选择性的阳离子交换层析介质，例如MegaPolyBXS、DiamondCD-S及DiamondSPMustang等，在去除聚集体、宿主蛋白HCP及Protein A方面表现优异。

疏水层析与离子交换层析相辅相成，通常对抗体的疏水性要求高于大多数杂质，主要用于去除抗体聚集体和宿主蛋白。HIC介质的疏水性对收率及杂质去除效果影响显著，因此选择合适的配基是疏水层析的关键。常见的疏水作用层析配基的疏水性强弱顺序为：Butyl-S＜Butyl＜Octyl＜Phenyl。此外，像DiamondMMC和DiamondMIX-A等多模式填料因其兼具疏水作用与离子交换作用而日益受到重视，这类新型混合模式介质在去除宿主蛋白、脱落的配基及多聚体等杂质方面具有高效的能力，可以有效简化纯化步骤，从而提高纯化效率。

随着抗体药物在临床治疗中的广泛应用，下游纯化工艺的开发显得愈发重要。灵活运用各种层析模式以及科学选择层析填料，将为抗体的纯化提供更经济高效的工艺路线。作为一家专注于提供高质量层析介质的高新技术企业，尊龙凯时自2008年成立以来，一直致力于推动分离纯化技术的发展，是中国较早具备大规模生产分离纯化介质能力的企业之一。我们提供涵盖各类分离纯化介质、预装柱、实验室及工业生产级空柱、微载体产品，同时也提供分离纯化工艺开发服务及填料定制，助力生物医药行业的不断进步。